今天小編給大家講講高效液相色譜柱峰形拖尾的9個(gè)原因：
1.色譜柱物理?yè)p壞
色譜柱有物理?yè)p壞是造成峰形拖尾的根源，解決方法就是更換新柱。
2.色譜柱內填料污染
流動(dòng)相和樣品中的雜質(zhì)是色譜柱主要污染源。
流動(dòng)相所用的各種溶劑至少是分析純，盡量使用色譜純試劑。
流動(dòng)相所用的水要是超純水或全玻璃器皿雙蒸水。
用前先用0.45um溶劑微孔過(guò)濾(器)過(guò)濾，除去可能存在的微粒。
流動(dòng)相建議現用現配，對于含鹽的溶液尤其注意長(cháng)置會(huì )產(chǎn)生細菌或出現沉淀。
此外還得保證儲存流動(dòng)相的容器清潔。
復雜樣品可選用0.45um溶劑微孔過(guò)濾(器)或樣品預處理柱對樣品進(jìn)行預處理，確保樣品中不含微粒雜質(zhì)。
若樣品不便處理，要使用保護柱。
柱內填料污染時(shí)，可將柱頭螺絲卸下，用專(zhuān)用工具挖出柱內前段被污染填料，再以相同的填料重新填入，修復。
或以能溶解污染物的流動(dòng)相按色譜柱使用的相反方向，沖洗色譜柱(約20至30倍柱體積，或視具體情況而定;另外，此時(shí)不能接檢測器)，將污染物沖出色譜柱，再按色譜柱標明的使用方向使用。
3.色譜柱進(jìn)口處有異物
當斷定是柱進(jìn)口處有異物時(shí)，可將柱頭螺絲卸下，取出濾帽并將其置于20%硝酸溶液中，用超聲波清洗約20分鐘，再置于超純水中，并用超聲波清洗約10分鐘，重新裝入色譜柱內即可。
4.樣品濃度過(guò)高致使柱超載
樣品在柱上超載能引起峰展寬，拖尾(或伸舌)。
適當減小進(jìn)樣量或樣品濃度(需要時(shí)，可提高檢測器靈敏度)直至峰形和保留時(shí)間不再改變，便可消除這種不良影響。
減小進(jìn)樣量還能改善其分離度。正常情況下，樣品中每種化合物在150×4.6mm柱中進(jìn)樣量保持在3～50ug范圍內，不會(huì )引起明顯超載。
5.樣品溶劑不對
選擇合適的樣品溶劑，以排除不必要的干擾。要選用流動(dòng)相溶解樣品。
6.柱外效應
柱外效應(即進(jìn)樣閥、色譜柱及檢測器間的管路過(guò)長(cháng)、直徑過(guò)粗、管路接頭不匹配、有死體積)是影響色譜柱柱效的主要因素之一。
所以在可能的條件下，色譜柱的兩端連接管路要盡可能短，連接管內徑盡可能細小，切口務(wù)必平整光滑，盡可能的減小死體積，以防止因樣品擴散造成不能反映色譜柱真實(shí)柱效等情況發(fā)生。
7.緩沖不足或不合適
在緩沖不好或離子強度過(guò)低的分離中，也會(huì )出現保留時(shí)間重現性差和峰形拖尾。增加緩沖濃度(與樣品大小相匹配)能改善此情況。
8.硅醇基團作用
仔細分析色譜柱內填料表面性質(zhì)可知：反相色譜柱填料的表面大約被鍵合相覆蓋了一半，其余的就是未被鍵合的硅醇基團。
所謂的保留是指樣品分子與鍵合相相互作用的結果。
但是，酸性或堿性化合物與硅膠表面殘存的硅醇基團或金屬雜質(zhì)之間相互作用而引起雙重保留機理，因此，發(fā)生了峰形拖尾。
為了減小峰形拖尾，通?？稍诹鲃?dòng)相加入25mM三乙胺(抑制劑)。三乙胺能與硅醇基團發(fā)生強烈的相互作用，從而降低或阻斷樣品分子與硅醇基團的作用，以保證保留機理正常進(jìn)行，并大大緩解了峰形拖尾。使用長(cháng)鏈的硅醇基抑制劑，雖起效較慢，但持續力較三乙胺長(cháng)。
因為抑制劑分子中除了胺基與硅醇基團發(fā)生極性作用外，大分子中非極性部分與固定相也會(huì )發(fā)生反相作用而產(chǎn)生保留現象。如果將抑制劑加至樣品中，效果會(huì )顯著(zhù)。
9.色譜柱內金屬污染
柱內金屬污染(Fe，Ni等)可引起某引些化合物峰形拖尾。金屬可由填料本身帶進(jìn)，也可由腐蝕性流動(dòng)相緩慢溶解柱進(jìn)口的金屬濾片，隨流動(dòng)相沉積到柱填料中。
例如C18柱填料被金屬污染后，造成酸性/堿性樣品拖尾，可用堿洗/酸洗后再鍵合的填料，得到的峰是尖銳且對稱(chēng)的。
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