免疫親和柱

TargPurfy AF M1免疫親和柱

黃曲霉毒素 M1 免疫親和柱，適用于各類(lèi)基質(zhì)復雜樣品（各種谷物、各類(lèi)食品、各

種飼料）中黃曲霉毒素 M1 的靶向精準提取凈化。

小柱中包含一種高效價(jià)、高純度單克隆抗體，對黃曲霉毒素 M1 有特異性選擇。

操作流程（按國標方法GB 5413.37-2010）

1、樣品提取

1.1 液態(tài)乳、酸奶樣品處理

※ 精密稱(chēng)取1g試樣于具塞離心管中，加10mL甲醇，渦旋3min；

※ 置于4℃、6000r/min下離心10min或過(guò)玻璃纖維濾紙；

※ 上清液或濾液轉移至燒杯中，加40mL水或PBS稀釋?zhuān)?/p>

※ 全部樣品過(guò)免疫親和柱凈化。

1.2 乳粉、特殊膳食用食品 樣品處理

※ 精密稱(chēng)取1g樣品，加入4mL預熱到50℃的純凈水，渦旋混勻至乳粉*溶解；

※ 冷卻至20℃后，加10mL甲醇，渦旋3min；

※ 置于4℃、6000r/min下離心10min或過(guò)玻璃纖維濾紙；

※ 上清液或濾液轉移至燒杯中，，加40mL水或PBS稀釋?zhuān)?/p>

※ 全部樣品過(guò)免疫親和柱凈化。

1.3 奶油 樣品處理

※ 精密稱(chēng)取1g樣品于離心管中，加入8mL石油醚，待奶油溶解；

※ 加入9mL水和11mL甲醇，振蕩30min，將全部液體移至分液漏斗中；

※ 加入0.3g氯化鈉充分搖動(dòng)溶解，靜置分層后，取下層溶液；

※ 旋轉蒸發(fā)至10mL以下，用PBS緩沖液（PH=7.4）稀釋至30mL，混勻；

※ 全部樣品過(guò)免疫親和柱凈化。

PBS配置：

0.20g KH2PO4＋2.92g Na2HPO4•12H2O＋8.0g NaCl+0.20gKCl 蒸餾水900mL溶解后,用鹽酸調節pH=7.4，

再加水定容至1000mL

2、過(guò)柱凈化

※ 將50mL SPE空柱管通過(guò)SPE轉接頭連接于免疫親和柱上端；

※ 處理好的樣品液以1~2滴/秒的速度通過(guò)免疫親和柱，棄掉流出的液體；

※ 用10mL水淋洗免疫親和柱，棄去流出液；

※ 利用真空設備抽干免疫親和柱1min；

※ 用乙腈（或甲醇）2mL×2淋洗免疫親和柱和空柱管兩次，收集全部洗脫液；

※ 在50℃氮氣下吹至近干（約100-200μL），用初始流動(dòng)相定容至1.0mL，渦旋

30s溶解殘留物，0.22/0.45μm濾膜濾過(guò)，收集續濾液上機檢測。

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