XBridge色譜柱使用維護十點(diǎn)心得

　　XBridge色譜柱的正確使用方法和細致的維護工作很重要，使用和維護不當會(huì )降低柱效、縮短壽命甚至損壞。在反相色譜操作過(guò)程中，需要注意下列問(wèn)題，以維護XBridge色譜柱的性和性。
　　一、避免壓力和溫度的急劇變化
　　溫度突變或使XBridge色譜柱從高處掉下都會(huì )影響柱內的填充狀況；柱壓突然升高或降低也會(huì )沖動(dòng)柱內填料，因此在調節流速時(shí)應該緩慢進(jìn)行，在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉動(dòng)不能過(guò)緩。
　　二、勿直接改變溶劑組成
　　改變溶劑的組成時(shí)，應逐漸緩慢改變，特別是反相色譜中，不應直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬?，反之亦然?br />　　三、禁止反沖
　　一般說(shuō)來(lái)XBridge色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí)，才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會(huì )迅速降低柱效。
　　四、流動(dòng)相方面
　　1.流動(dòng)相須經(jīng)過(guò)超聲和0.45um濾膜除去微粒；
　　2.純度要求?
　　→超純水（HPLC用水）；
　　→緩沖液pH值2~8；
　　→緩沖鹽濃度（一般10mM~20mM）；
　　→有機溶劑（色譜純，雜質(zhì)含量盡量低）。
　　提示：選擇使用適宜的流動(dòng)相（尤其是pH），可避免固定相被破壞。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一預柱，可使流動(dòng)相在進(jìn)固定相之前預先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
　　五、樣品方面
　　1.確保樣品不和填料基質(zhì)相互作用；
　　2.了解樣品的溶解性，若樣品的溶劑不是流動(dòng)相，用流動(dòng)相試溶解，防止樣品析出；
　　3.樣品上樣前須經(jīng)過(guò)0.45um的濾膜過(guò)濾去除微粒和雜質(zhì)；
　　4.避免將復雜的樣品尤其生物樣品直接注入柱內，在進(jìn)樣器和XBridge色譜柱間連一保護柱。
　　六、保清潔防干燥
　　保存XBridge色譜柱時(shí)應將柱內充滿(mǎn)乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發(fā)干燥。
　　七、加補填料
　　反相XBridge色譜柱壽命在正確使用時(shí)可達2年以上。新的XBridge色譜柱在使用一段時(shí)間后柱頂填料可能塌陷，使柱效下降，這時(shí)也可補加填料使柱效恢復。
　　八、清洗
　　水/乙腈（95/5）→100%乙腈→乙腈/異丙醇（75/25）→100%異丙醇→100%二氯甲烷→100%己烷
　　九、再生
　　30倍柱體積?正己烷→二氯甲烷→異丙醇→二氯甲烷→流動(dòng)相。
　　注意：若需用到二氯甲烷、己烷，使用反相流動(dòng)相前需用異丙醇過(guò)渡?。
　　柱子使用完后，用洗脫能力強的洗脫液沖洗XBridge色譜柱，清除保留在柱內的雜質(zhì)。在進(jìn)行清洗時(shí)，以水、甲醇、乙腈、一氯甲烷（或氯仿）依次沖洗，再以相反順序依次沖洗。
　　十、保存
　　1.存放前的處理（除去雜質(zhì)、緩沖鹽）；
　　2.合適的存放溶劑（甲醇抑菌能力強于乙腈）；
　　3.避免柱床的干涸；
　　4.避免機械震動(dòng)（輕拿輕放）；
　　5.存放的溫度4~30。