細胞內存在許多復雜的調控系統,其中蛋白酶起著(zhù)至關(guān)重要的作用。蛋白酶抑制劑作為一類(lèi)重要的生物活性分子,具有調節蛋白酶活性的能力,對于細胞內的信號傳導、生命活動(dòng)等起著(zhù)不可忽視的影響。
蛋白酶抑制劑(protease inhibitor)從廣義上指與蛋白酶分子活性中心上的一些基團結合,使蛋白酶活力下降,甚至消失,但不使酶蛋白變性的物質(zhì)。從放線(xiàn)菌發(fā)酵液中分離到亮肽素、抗痛素、糜蛋白酶抑素、抑彈性蛋白酶醛、抑胃蛋白酶素、磷酰胺素等,能分別抑制胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、糜蛋白酶、彈性蛋白酶、胃蛋白酶、金屬蛋白酶等各種蛋白酶。都屬于蛋白酶抑制劑。
破碎細胞提取蛋白質(zhì)的同時(shí)可釋放出蛋白酶,這些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白質(zhì)不被降解。在蛋白質(zhì)提取過(guò)程中,需要加入蛋白酶抑制劑以防止蛋白水解。以下列舉了5種常用的蛋白酶抑制劑和他們各自的作用特點(diǎn),因為各種蛋白酶對不同蛋白質(zhì)的敏感性各不相同,因此需要調整各種蛋白酶的濃度。由于蛋白酶抑制劑在液體中的溶解度極低,尤其應注意在緩沖液中加入蛋白酶抑制劑時(shí)應充分混勻以減少蛋白酶抑制劑的沉淀。
根據蛋白酶抑制劑的來(lái)源和作用方式,可以將其分為以下幾類(lèi):
1.天然抑制劑:天然界存在著(zhù)許多具有抑制蛋白酶活性的分子,如酪蛋白、胰島素和血漿酶等。它們以天然蛋白質(zhì)的形式存在于生物體內,通過(guò)與蛋白酶結合來(lái)抑制其活性。
2.人工合成抑制劑:科學(xué)家通過(guò)化學(xué)合成的方式,創(chuàng )造出一類(lèi)具有特定結構和功能的抑制劑。這些抑制劑可以針對特定的蛋白酶進(jìn)行設計,以實(shí)現更精確的調控。
3.基因工程抑制劑:利用基因工程技術(shù),將抑制劑的基因導入細胞中,使其在細胞內大量表達。這種方式可以實(shí)現對特定蛋白酶的持續抑制,從而對細胞功能進(jìn)行更深入的研究。